DNA聚合酶，又称DNA依赖的DNA聚合酶，它是以亲代DNA为模板，催化底物dNTP分子聚合形成子代DNA的一类酶。DNA聚合酶的作用：聚合作用、校对作用、切除修复作用。
DNA聚合酶是一种参与DNA复制的酶。它主要是以模板的形式，催化脱氧核糖核苷酸的聚合。聚合后的分子将会组成模板链并再进一步参与配对。
聚合作用：在引物RNA-OH末端，以dNTP为底物，按模板DNA上的指令，即A与T，C与G的配对原则，逐步逐个、连续地将dNTP加到延伸中的DNA分子3-OH末端，逐步合成延长中的子链DNA。这是DNA聚合酶的主要作用;
3’→5’外切酶活性(校对作用)：这种酶活性的主要功能是从3’→5’方向识别和切除不配对的DNA生长链末端的核苷酸，3’→5’外切酶活性的主要功能是校对作用，当加入的核苷酸与模板不互补而游离时则被3’→5’外切酶切除，以便重新在这个位置上聚合对应的核苷酸，可见，3’→5’外切酶活性对DNA复制真实性的维持是十分重要的。以保证复制过程的保真性和准确性;
5’→3’外切酶活性(切除修复作用)：该活性是从5’→3’方向水解DNA延长链前方的DNA链(即只对DNA上双链处的磷酸二酯键有切割作用)，主要产生5—脱氧核苷酸。这种酶活性在DNA损伤的修复中可能起着重要作用。
